PCR实验室建设规范和装修要求
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  • 时间:2022-12-27
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PCR实验室布局

原则上分为四个区域:试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区。

PCR实验室原则上为试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区四个单独的工作区域并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密相连,需安装物品传递窗。

PCR实验室区域的设置并不是一成不变的,以下几种情况需要说明:

1.如果样本在扩增之前需要粉碎处理,则需要增加一个区域用于样品的粉碎。

2.如果采用实时荧光PCR法,则扩增区和分析区可以合并为一个区。

3.如果采用全自动化PCR分析仪,则标本制备区、扩增区和分析区可以合并为一个区。

前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,扩增前区与扩增后区应严格分开。实验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试剂准备区、样品制备区到扩增区和扩增产物分析区,不得逆向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254nm,每20㎡一支40W的紫外灯。

二.实验室各区功能及主要设备

原则上的四大区域注意正压负压的控制。

1.试剂准备区:

主要进行试剂的制备、分装和主反应混合液的制备。试剂和用于样品制作的材料应直接运送至该区,不得经过其它区域。试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。本区主要设备有天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。

对于气流压力的控制,本区并没有严格的要求。

2.样品制备区:

主要进行样品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。本区主要设备有冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器、恒温水浴等。

本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。

3.扩增区:

该区域的功能是DNA扩增和扩增片段的测定。此外,反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液和已制备的DNA模板(来自标本制备区)的加入等也可在本区内进行。对于气流压力的控制,相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。

该区域的设备主要是核酸扩增热循环仪、加样器、超净台等。其中热循环仪的电源应专用,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响主要进行DNA扩增。

本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。

4.扩增产物分析区:

扩增产物的测定。本区主要设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等。

本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域

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